Дипломная работа на тему: Исследование антиоксидантного потенциала листьев и ветвей клёна ясенелистного (Acer negundo L.)

План работы:

ВВЕДЕНИЕ 3
ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР 6
1.1. Активные формы кислорода 6
1.2. Антиоксидантная система 10
1.3. Генетические аспекты антиоксидантной защиты растений 12
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 14
2.1. Материалы 14
2.2. Подготовительный этап 16
2.3. Измельчение растительных тканей в жидком азоте 16
2.4. Методы биохимии 16
2.5.1. Приготовление ферментных вытяжек 16
2.5.2. Приготовление раствора для измерения концентрации белка 18
2.5.3. Приготовление водных и спиртовых вытяжек для измерения антиоксидантной активности 19
2.5.4. Определение содержания белков коллоидным окрашиванием на спектрофотометре 21
2.5.5. Определение каталазной активности по скорости выделения кислорода с применением электрода Кларка 21
2.5.6. Определение концентрации хлорофилла на спектрофотометре 23
2.5.7. Определение антиоксидантной активности ткани по железовосстанавливающей силе вытяжек 24
2.6. Методы молекулярной биологии 24
2.6.1. Выделение РНК с помощью метода Лира от Биолабмикс 24
2.6.2. Выделение РНК с помощью метода R-Plants от Биолабмикс 26
2.6.3. Измерение концентрации РНК 28
2.6.4. Синтез кДНК 29
2.6.5. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) и ПЦР в реальном времени 30
2.6.6. Электрофорез 32
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 34
3.1. Определение содержания белков 34
3.2. Определение каталазной активности 35
3.3. Определение концентрации хлорофилла 36
3.4. Определение антиоксидантной активности 36
3.5. Результат измерения концентрации РНК 37
3.6. Электрофорез препаратов РНК 37
3.7. Результат электрофореза продуктов обычного ПЦР 38
3.8. Количественное определение экспрессии генов при проведении ПЦР в реальном времени 40
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 42
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 45
ПРИЛОЖЕНИЕ 50