Дипломная работа на тему: Особенности функционирования мутантных фотосистем Rhodobacter sphaeroides с альтернативным расположением бактериохлорофилла РВ

План работы:

ВВЕДЕНИЕ 3
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 5
1.1. Строение фотосинтетической мембраны 5
1.2. Перенос электрона в реакционном центре 8
1.3. Система для мутагенеза реакционного центра 11
1.4. Наиболее значимые мутации 15
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 21
2.1. Материалы, использованные в работе 21
2.2. Методы молекулярной биологии 23
2.2.1. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) 23
2.2.2. Выделение плазмид методом щелочного лизиса 24
2.2.3. Горизонтальный электрофорез в агарозном геле 25
2.2.4. Лигирование молекулы вектора и фрагмента 26
2.2.5. Электропорация 27
2.2.6. Перенос плазмид для комплементации из E. сoli в С. sphaeroides 28
2.3. Методы микробиологического и биохимического анализа 29
2.3.1. Выращивание пурпурных бактерий 29
2.3.2. Выделение РЦ методом ионообменной и аффинной хроматографии 30
2.3.3. Измерение спектров поглощения при комнатной температуре 31
2.3.4. Измерение дифференциальных (свет-минус-темнота) спектров поглощения 32
2.3.5. Пигментный анализ реакционных центров 32
2.3.6. Определение термостабильности мутантных реакционных центров 34
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЯ 35
3.1. Получение рекомбинантного штамма C. sphaeroides, несущего полигистидиновую метку 36
3.2. Спектры поглощения 39
3.3. Пигментный анализ 40
3.4. Дифференциальные (свет минус темнота) спектры поглощения 41
3.5. Изучение термостабильности РЦ дикого типа и двойного мутанта 42
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 45
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 47