Дипломная работа на тему: Изучение роли С-концевого фрагмента малой субъединицы HydSL- гидрогеназы, прикрепленной к мембране в серной бактерии Thiocapsa roseopersicina BBS

План работы:

ВВЕДЕНИЕ 3
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 7
1.1. Систематическое положение Thiocapsa roseopersicina 7
1.2. Краткая характеристика Thiocapsa roseopersicina 7
1.3. Роль водорода в метаболизме пурпурных бактерий 9
1.4. Особенности бактериальных гидрогеназ и их общая характеристика 10
1.5. Основная классификация и локализация бактериальных гидрогеназ 13
1.6. Характеристика функции некоторых [Ni-Fe]-гидрогеназ 16
1.7. Особенности строения и функции гидрогеназы серной бактерии Thiocapsa roseopersicina BBS 19
1.8. Возможности практического использования бактериальных гидрогеназ 21
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 23
2.1. Объекты и материалы 23
2.2. Методы 24
2.2.1. Спектрофотометрический метод 24
2.2.1.1. Метод определения суммарной гидрогеназной активности образца, по поглощению молекулярного водорода 24
2.2.1.2. Метод для определения HydSL-гидрогеназной активности по восстановлению серы до сульфида 25
2.2.2. Хроматографический метод по выделению молекулярного водорода 26
2.2.3. Метод определения количества белка (метод Лоури) 26
2.2.4. Метод определения содержания бактериохлорофилла а (метод ацетон-метанольной экстракции) 27
2.2.5. Приготовление коллоидной серы 28
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 29
3.1. Изучение развития исследуемых штаммов T. roseopersicina по изменению содержания бактериохлорофилла-А 29
3.2. Изучение распределения HydSL-гидрогеназ родительского и мутантных штаммов T. roseopersicina в мембранной и растворимой фракции бесклеточных экстрактов 31
3.3. Изучение влияния делеции С-концевого участка малой субъединицы и добавления полигистидиновой метки на способность HydSL-гидрогеназы к образованию сероводорода из молекулярной серы 34
ВЫВОДЫ 40
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 41
ПРИЛОЖЕНИЕ 46