Дипломная работа на тему: Оценка биохимических стратегий стресс-адаптации байкальских глубоководных амфипод вида Ommatogammarus flavus при изменении температуры среды

План работы:

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ 3
ВВЕДЕНИЕ 4
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 7
1.1. Общие понятия стресса и адаптации 7
1.2. Температурный стресс 8
1.2.1. Температура как стрессовый фактор 8
1.2.2. Влияние температуры на водные организмы 8
1.3. Основные показатели неспецифического стресс-ответа, используемые в качестве маркеров стрессовых состояний 10
1.3.1. Уровень перекисного окисления липидов 10
1.3.2. Активность ферментов антиоксидантной системы 11
1.3.3. Белки теплового шока 13
1.3.4. Лактат 14
1.3.5. Лактатдегидрогеназа 14
1.4. Энергетический метаболизм 15
1.4.1. Основные компоненты энергетического метаболизма 15
1.4.2. Аэробный метаболизм 17
1.4.3. Анаэробный метаболизм 17
1.5. Физические особенности среды обитания глубоководных организмов 18
1.6. Адаптации гидробионтов к обитанию на глубине 19
ГЛАВА 2. ОБЪЕКТ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 23
2.1. Систематика и экология объекта исследования 23
2.2. Методика проведения эксперимента 24
2.3. Выделение энергетических метаболитов 24
2.4. Определение содержания энергетических метаболитов 25
2.4.1. Определение содержания глюкозы и гликогена 25
2.4.2. Определение содержания аденилатов (АТФ, АДФ, АМФ) 26
2.4.3. Определение содержания лактата 27
2.5. Определение содержания продуктов ПОЛ 28
2.6. Определение активности ферментов 29
2.6.1. Выделение и определение активности каталазы 29
2.6.2. Определение активности пероксидазы 30
2.6.3. Определение активности ГСТ 31
2.6.4. Определение активности ЛДГ 31
2.7. Определение содержания белков теплового шока 32
2.7.1. Выделение белка 32
2.7.2. Одномерный электрофорез в полиакриламидном геле 33
2.7.3. Вестерн-блоттинг 33
2.8. Статистическая обработка данных 35
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ 36
3.1. Оценка смертности O. flavus при градиентном повышении температуры среды 36
3.2. Оценка содержания энергетических метаболитов у O. flavus при градиентном изменении температуры среды 37
3.2.1. Оценка содержания глюкозы и гликогена у O. flavus при градиентном изменении температуры среды 37
3.2.2. Оценка содержания АТФ, АДФ, АМФ и уровня энергии аденилатов у O. flavus при градиентном изменении температуры среды 38
3.2.3. Оценка содержания лактата у O. flavus при градиентном изменении температуры среды 40
3.3. Оценка уровня продуктов ПОЛ у O. flavus при градиентном изменении температуры среды 41
3.3.1. Оценка уровня продуктов ПОЛ в нейтральных липидах у O. flavus с глубины 100 и 300 м при градиентном изменении температуры среды 42
3.3.2. Оценка уровня продуктов ПОЛ в фосфолипидах у O. flavus с глубины 100 и 300 м при градиентном изменении температуры среды 45
3.4. Оценка активности ферментов АОС у O. flavus при градиентном изменении температуры среды 48
3.4.1. Оценка активности каталазы у O. flavus при градиентном изменении температуры среды 48
3.4.2. Оценка активности пероксидазы у O. flavus при градиентном изменении температуры среды 49
3.4.3. Оценка активности глутатион S-трансферазы у O. flavus при градиентном изменении температуры среды 49
3.4.4. Оценка активности лактатдегидрогеназы у O. flavus при градиентном изменении температуры среды 51
3.5. Оценка содержания БТШ70 у O. flavus с глубины 100 м при градиентном изменении температуры среды 51
3.6. Обсуждение результатов 52
ВЫВОДЫ 58
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 59