Дипломная работа на тему: Разработка метода выявления трематод у пресноводных моллюсков с применением ПЦР

План работы:

ВВЕДЕНИЕ 3
ГЛАВА 1. АНАЛИТИЧЕСКИЙ ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 7
1.1. Трематоды и их жизненный цикл 7
1.2. Методы выявления трематод 16
1.2.1. Микроскопический анализ 17
1.2.2. Иммунологический анализ 18
1.2.3. Молекулярно-генетический анализ (ПЦР) 18
1.3. ПЦР и ее специфичность 19
1.3.1. Полимеразная цепная реакция 19
1.3.2. Компонентный состав смеси для ПЦР 23
1.3.3. Параметры амплификации 27
1.4. Выводы и постановка задач 32
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 34
2.1. Объекты исследования 34
2.2. Методы исследования 35
2.2.1. Выделение ДНК с помощью набора NucleoSpin Tissue 35
2.2.2. Получение ПЦР-продукта из ДНК 37
2.2.3. Электрофоретическое определение молекулярной массы ДНК 38
2.2.4. Выделение ПЦР-продукта из геля набором Cleanup Mini 39
2.2.5. Подготовка ПЦР-продукта на секвенирование 40
ГЛАВА 3. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ 42
3.1. Выявление зараженных моллюсков 42
3.2. Вырезание целевых ПЦР-продуктов из геля 44
3.3. Подготовка образцов на секвенирование 46
3.4. Анализ электрофореграмм после секвенирования 46
3.5. Механизм выявления инфицированных моллюсков 47
3.5.1. Выявление зараженных моллюсков 47
3.5.2. Определение видовой принадлежности трематод 48
ВЫВОДЫ 49
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 50